中药蓝玉簪颗粒对慢性哮喘小鼠气道重建的影响及机制

目的:观察中药蓝玉簪颗粒对慢性哮喘小鼠气道重建的抑制作用并探讨其机制.方法:将32只雌性BABL/c小鼠随机分成正常对照组(A组),慢性哮喘模型组(B组),蓝玉簪颗粒组(C组,1.0 g生药/3.0 kg体质量)和地塞米松干预组(D组,2.0 mg/kg),以卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏并长期雾化吸入制备小鼠慢性哮喘模型.苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠肺组织一般病理学改变;阿尔辛蓝-过碘酸-希夫氏(AB-PAS)染色观察气道上皮杯状细胞增生、黏液分泌情况;天狼猩红(SR)染色观察气道壁胶原沉积并检测肺组织羟脯氨酸(HYP)含量以评价气道上皮下纤维化,采用免疫组化半定量法测定气道壁转化生长因子β1 (TGF-β1)含量.计算机图像分析软件测定气道外、内径比值(Po/Pi),气道壁厚度和面积(Awt,Aaw)以及TGF-β1免疫组化阳性染色面积与气道基底膜周径(Pbm)比值(如Awt/Pbm,TGF-β1/Pbm)等.结果:B组小鼠气管及血管周围大量炎性细胞浸润,气道黏膜上皮增生,气道黏液高分泌及气道上皮下胶原沉积增多,气道壁TGF-β1表达增强;Po/Pi,Awt/Pbm,Aaw/Pbm以及TGF-β1/Pbm,肺组织HYP含量等所有指标均显著增高.C组与B组之间比较差异均有统计学意义(P＜0.01);C组与A,D组比较差异具有统计学意义(P＜0.05).TGF-β1的表达与肺组织HYP含量呈显著正相关(rs=0.669,P＜0.01).结论:中药蓝玉簪颗粒可以抑制慢性哮喘小鼠气道炎症及气道重建,其机制可能与抑制TGF-β1表达有关.     

重组人骨形成蛋白-2在造血损伤治疗中作用机制的探讨

目的 探讨重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)在治疗造血损伤中的作用机制,构建探针并通过原位杂交技术观察rhBMP-2治疗小鼠急性造血损伤的作用。方法 将22只BALB/c雌性小鼠随机分为照射组和骨形成蛋白治疗组。把正常雄性小鼠的骨髓细胞移植给接受8.5 Gy ⁶⁰Coγ 射线照射的22只BALB/c雌性小鼠。14 d后,剩余存活的雌性小鼠左股骨再接受9 Gy的电子线照射。骨形成蛋白治疗组小鼠每天每只腹腔注射重组人骨形成蛋白-2 20 mg/kg,连续治疗6 d,照射对照组每天每只腹腔注射等量生理盐水。14 d后,处死小鼠并取股骨制成石蜡切片。用原位杂交技术检测雌性小鼠股骨中雄性供体小鼠的骨髓细胞。结果 原位杂交结果显示,照射组小鼠左股骨骨髓中的供体来源细胞数量明显比骨形成蛋白治疗组小鼠左股骨骨髓中多(T=155.0,P<0.05)。而照射组小鼠左股骨骨髓中供体来源细胞数量与2组小鼠右股骨骨髓中相比则无明显差异(T=92.0、78.5,P>0.05)。骨形成蛋白组小鼠左股骨骨髓中的供体来源细胞数量明显比两组小鼠右股骨骨髓中少(T=155.0、55.0,P<0.05)。结论 rhBMP-2促进了自身受损伤的骨髓细胞修复,故在骨形成蛋白组小鼠的左股骨骨髓中几乎检测不到供体雄性小鼠SRY基因的存在。推测rhBMP-2促进了自身骨髓间充质干细胞增殖或分化,并改善造血微环境,加快造血修复、重建的过程。     

复合bFGF缓释微球的制备与性能测定

目的:制备复合碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的可降解缓释微球,考察其各项性能,为进一步应用于组织工程奠定基础.方法:采用改良的乳化冷凝法交联制备复合bF-GF的缓释微球,测定微球形态、粒径、载药率和包裹率等,并采用ELISA法考察其体外bFGF的缓释效能.结果:缓释微球平均粒径(12.4±3.6)μm;平均载药率为0.24%,平均包裹率为96.82%.d 1体外释放28.23%,2～5 d时累积释放率达到57.19%,d 7时释放减慢且累计浓度为93.94%.结论:复合bFGF的缓释微球制备工艺简便,性能优良;可在较长时间内持续释放活性bFGF,与组织工程支架的结合应用具有可行性.     

虎杖苷对低氧所致大鼠肺微血管内皮细胞损伤的保护作用

目的探讨虎杖苷对低氧所致大鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)损伤的保护作用及其可能的机制。方法采用组织块法培养PMVECs,免疫荧光检测特异性标志物Ⅷ因子相关抗原的表达,结合形态学鉴定细胞;不同浓度的虎杖苷(30,60和120μmol.L-1)干预后,分别在常氧与低氧环境下培养24,48和72 h,MTT法观察细胞生长情况,检测LDH活性,ELISA法测定细胞上清液中血管内皮细胞生长因子(VEGF)的含量,免疫组化法检测VEGF的表达。结果培养的PMVECs具有鹅卵石形态,Ⅷ因子相关抗原呈阳性表达,鉴定为PMVECs;虎杖苷对低氧下PMVECs活性的影响作用明显,并能显著降低低氧所致的细胞培养液中LDH活性升高、VEGF的含量升高及表达增加。结论虎杖苷在低氧环境下对PMVECs有明显的保护作用,其机制可能与虎杖苷对抗低氧致LDH活性升高、VEGF表达增加有关。     

E-learning在临床药理学教学中的应用研究

E-Learning是指通过因特网或其他数字化内容进行教学与学习的活动,具有学习模式自由自主、教学资源利用率高、教育成本投入低的特点。临床药理学是医药学生基础课程之一,目前存在着课程特色不突出、教学对象无区分、课程教学难度大、理论和临床实践脱节等问题。E-learning的引入能极大激发学生的学习兴趣,提高学生分析解决问题的能力,突出临床药理学的临床特色,从而提高临床药理学的教学效果。